ソリューションの概要
マルチパラメータフローサイトメトリーにおける データ変動の改善
課題
臨床試験からCOVID-19に関連する免疫学の研究に至るまで、マルチパラメータフローサイトメトリーにおけるパラメータ数を増やす需要が高まっています。 残念ながら、フローサイトメトリーは統計的な手法です。 細胞の自然な変動と、個々の細胞に結合する各蛍光色素の量により、プロットされたデータは単一の点ではなく「点群」を形成することになります。 そのため、曖昧さのない計数を行うには、このデータの変動係数(CVまたはrCV)をできる限りあらゆる方法で小さくして点群のオーバーラップを少なくすることが必要です。
ソリューション
CoherentのOBISシリーズのスマートレーザは、増加したパラメータを低いCVにより2つの方法でサポートします。 まず、低振幅ノイズ、高ビーム品質、熱的に安定したポインティングを特徴とし、レーザの信号対雑音(SNR)がきわめて優れています。 これは重要な利点です。レーザのSNRはデータノイズに直接影響し、データのCV全体に影響するからです。 第2に、これらのレーザはいくつかの異なる技術を利用して、30を超える異なる励起波長を実現しました。 特に、新たなUVおよび近赤外波長により、検出スペクトルバンド幅を直接増加させることができます。 バンド幅を増やすと、同じスペクトル分離を維持しながら、同じ測定器でより多くのパラメータを測定できます。 これには、データCVを低下させるのと同じ効果があります。
ビーム品質は、フローストリーム全体でほぼ均一な強度を生成する能力に影響します。 ビーム品質が機器のノイズに与える影響は、対象となる細胞のサイズに部分的に依存します。 細胞が小さいほど、フローストリーム内の位置がより大きく変動するため、励起の均一性がより優れている必要があります。 OBISレーザは、ビーム品質パラメータが通常M2 ≤ 1.2未満の円形出力ビームを生成します。 これは血球数の測定とよくマッチしています。 これに対し、M2が大きいと、ニアフィールドとファーフィールドの両方で不均一なパターンになります。
OBISレーザは出力も選択可能で直接変調に対応しており、機器のスループットを向上させ、機器の複雑さを軽減できます。
メリット
どれほど機器の設計や組み立てが適切であっても、その性能は最終的に重要な部品の性能に依存します。 レーザは、おそらくフローサイトメトリーにおいて最も重要な部品であると言えるでしょう。 その性能がデータCVを増加させる制限要因となるべきではありません。 OBISレーザを使用することで、極めて要求の厳しい臨床や研究用途でのパフォーマンスを最適化できます。
適用分野
マルチパラメータフローサイトメトリー、免疫学、血液病理診断、血液分析。
図1 : マルチパラメータ機器において、各細胞タイプは局所的なデータポイントではなく「ドットプロット」と呼ばれるデータポイントの広がりを生成します。 画像提供 : IDEXX Laboratories, Inc.
図2 : M2が大きいと、目立った不規則性を伴う集光強度パターンが発生することがあります(上記)。 OBISレーザは、円形の集光スポットでM2 ≤ 1.2を実現します(下記)。