Chameleon 的灵活性和可靠性是提高实验室工作效率的关键

挑战

位于法国巴黎的大型生物医学研究中心 Cochin 研究所（Inserm U1016、CNRS UMR 8104 和 Université Paris Cité UMR-S1016）拥有一套光子成像设施 (IMAG’IC)。 IMAG'IC 设备齐全，共有 15 种不同的显微镜，可用于几乎所有类型的光学显微成像。 这是一个开放共享合作的设施，从而 Cochin研究所 和其他地方的研究人员都能够使用最先进的设备进行前沿研究。 研究对象包括体外和体内的不同样本（如细胞或组织）。 许多仪器位于安全等级是二级和三级的生物实验室中，可用于对活细胞、来自人体的组织样本和/或感染病原体的组织样本以及感染传染病的哺乳动物进行研究和成像。

Bohlin 博士 Thomas Guilbert 是 IMAG'IC 的一名研究工程师，他说：“我们拥有一台已有大约 15 年历史的多光子显微镜，其中包括一台可调谐 (Chameleon Ultra II) 超快激光器，主要用于 SHG 实验。 我们最近获得了购买第二台多光子显微镜的资金，需要选择性能优异的激光器。以扩大我们的成像解决方案的范围。 我们特别需要一种能够支持各种非线性成像技术的激光器，这些成像技术包括短波和长波荧光探针，以及内源荧光、谐波（SHG、THG）成像等无标记技术，还有荧光寿命成像（FLIM）。 我们还需要激光器操作简单，可靠性高，以便支持 IMAG'IC 用户密集的使用频率（每年约 250 名用户），而他们在高级显微成像领域中经验差异很大。”

解决方案

IMAG'IC 团队为新的显微镜考虑了几种激光器，最终选择了相干公司的 Chameleon Discovery。 Thomas 表示，出于几个因素，这款激光器非常适合他们的需求。 他指出，“这款激光器的光谱范围比较宽，为 660 nm 至 1320 nm，可以满足所有常见探针、转基因蛋白质以及无标记技术的激发波长要求。 它可以快速适应不同类型的实验，从无标记载玻片上的谐波成像到小型哺乳动物的活体显微成像。“ 他还提到，这款激光器 具有第二个1040 nm的同步输出光束，这对于需要同时激发两个波长的实验以及受激拉曼实验的用处都很大。

Thomas 补充说：“我们确实需要激光器具有卓越的可靠性，来支持高使用频率的实验。根据 Ultra II 的长期使用经验，以及我在攻读博士学位期间经常使用 Mira 900 的经验，我们有理由相信相干公司的Chameleon系列 激光器具备这种可靠性。 我们还想要获得 Discovery 提供的色散预补偿功能。 此外，我们需要短脉宽和高峰值功率，最大限度提高厚组织中的成像深度，甚至进行一些烧蚀。”他解释说，一些研究人员正在使用激光在胶原凝胶样本内部进行烧蚀，以制作合成的模型血管。 最后他补充说，激光器搭配脉冲同步器与外部检测器，可以实现 FLIM 成像和 FRET-FLIM 等技术，或者轻松识别出具有相同发射光谱的两个荧光分子。

结果

Thomas 表示，Discovery 的灵活性和可靠性使他们的新型显微镜得到了广泛的使用，仅在其运行的前 20 个月中就发表了6 篇以上论文，而且未来还会有更多的文章发表。 这些文章中包括对器官发育，多种皮肤病的显微成像和护理方法，以及对透明组织、体外组织和活体组织（包括肺、肾和脑）的显微成像。 还有一些特殊研究，需要对肿瘤活切片中的免疫细胞的迁移过程进行成像。 Thomas 本人经常参与这些研究工作，如 Yannick Allanore 和 Frédéric Batteux 教授主导的纤维化研究，他们的研究重点是慢性纤维炎性疾病（如系统性硬化症、类风湿性关节炎和子宫内膜异位症）的发病机制和创新疗法。 SHG 成像非常适合此类研究，因为它可以选择性地对胶原蛋白（参与纤维化的主要成分）进行成像，当然这种技术也不需要标记。 

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